بیماری لوک آمریکایی (AFB)

بیماری لوک آمریکایی ( American Foulbrood) [AFB] ، نوعی بیماری باکتریایی بومی و همه گیر است، که توسط لارو Paenibacillus  ایجاد می شود. لارو پنی باسیلوس فقط در یکی دو سالگی، می تواند لاروهای زنبور عسل را آلوده کند.

هیچ آنتی بیوتیکی وجود ندارد که بتواند تخم لارو Paenibacillus را از بین ببرد. وقتی لارو پنی باسیلوس باید در ژل کارگر درمان شود، لارو زنبور عسل یک یا دو روزه می باشد و آلوده نشده است. بیشترین اثرات مخرب بیماری لوک آمریکایی در اوایل بهار و پایان فصل دیده می شود. به دلیل اینکه در این مدت مقدار زیادی ژل کارگر تولید می شود.

برای هفده سال (چهارده سال در ایران و سه سال در کانادا) زنبورستان شرکت کاسپین با استفاده از محلول کاسپین، ترکیبی از ژله رویال، فرمون و سایر مواد طبیعی، بیماری لوک آمریکایی را از بین برده است. این محلول تولید ژله کارگر را افزایش می دهد، که باعث انتقال لارو Paenibacillus از اسپور (تخم) به باکتری می شود. و فرصت نابودی باکتری ها را با مقدار بسیار کمی آنتی بیوتیک فراهم می کند.

فرمون موجود در محلول کاسپین کل کندو را تحریک می کند تا درصدی از بیماری را  از سلول ضدعفونی و تمیز کند. این روش درمانی سوزش را از بین می برد و به یک زنبوردار امکان این را می دهد تا از تجهیزات، ملکه ها، جمعیت، موم، گرده و عسل موجود در کلنی های AFB  استفاده کند.

۹۰ درصد از بیماری AFB را می توان در یک نسل (۲۱ روز) از بین برد. ۱۰۰ درصد بیماری AFB توسط نسل سوم (۶۰ روز) از بین می رود.  میزان تخریب توسط بیماری لوک آمریکایی به تغذیه کلنی، کیفیت ملکه و تعداد اسپورها ( تخم های) کندو بستگی دارد.
 

معرفی بیماری لوک آمریکایی

لارو پنی باسیلوس باعث بیماری (AFB) می شود. این  لارو در کندو به دو شکل یافت می شود:

شکل فعال: در هنگام تکثیر سریع باکتری ها در داخل لارو زنبور عسل آلوده

شکل اسپور (تخم): در هنگام خوابیدن باکتری ها.

اسپورهای لارو پنی باسیلوس می توانند برای ده ها سال زنده بمانند. آنتی بیوتیک ها در مرحله رشد فعال، می توانند باکتری های در حال تکثیر را به سرعت از بین ببرند. اما در برابر اسپورها بی اثر هستند. اسپورها (تخم ها) در برابر گرمای بالای ۱۰۰ درجه سانتیگراد مقاوم هستند.

روش های کنترل به دستکاری شدید کندو یا استفاده مداوم از آنتی بیوتیک ها بستگی دارند. هیچ یک از گزینه ها منحصرا موثر نبوده است. مورد اخیر منجر به حالتی از AFB مقاوم در برابر آنتی بیوتیک شده است.

این مقاله یک روش کنترل AFB را توصیف می کند که برای جامعه بین المللی زنبورداری جدید خواهد بود. اما از سال ۱۹۸۶ در ایران استفاده می شود. این روش درمان تا حد زیادی به سیستم ایمنی زنبورها و توانایی طبیعی آنها در مبارزه با بیماری بستگی دارد. دستکاری جزئی در کندو و یک رژیم غذایی از مواد غذایی خاص و غنی، محلول کاسپین نامیده می شود که با مقدار کمی آنتی بیوتیک استفاده می شوند. در نتیجه ۱۰۰٪  بیماری کنترل می شود.
 

مواد محلول کاسپین

محلول شرکت کاسپین مخلوطی از ژل رویال، فرمون و سایر مواد طبیعی است. محلول کاسپین با گرده زنبور عسل، عسل، شکر و آب مخلوط شده و این مخلوط به صورت مایع به زنبورهای عسل تغذیه می شود. آنتی بیوتیک های استفاده شده با محلول کاسپین شامل اریترومایسین (erythromycin)، استرپتومایسین (streptomycin)، آمپی سیلین (ampicillin)، O.T.C  یا آموکسی سیلین (amoxicillin) می باشند.
 

تکنیک ها و روش ها

یک برنامه درمانی موفق باید شامل: ایجاد یک کلنی مستحکم و سالم، تحریک ملکه برای ایجاد بچه قوی و حمله به لارو پنی باسیلوس در ژله کارگر، قبل از ورود باکتری به لارو زنبور عسل، باشد؛ راه حل شرکت کاسپین و تکنیک و روش آن دقیقاً این کار را انجام می دهد.

شرکت کاسپین از دو روش مختلف استفاده کرده است. یک روش برای کلنی با بچه ها و جمعیت؛ و روش دوم، برای کلنی بدون بچه.

 در زیر نمونه هایی از روش های درمانی که صدها بار استفاده شده، شرح داده شده است.
 

روش کلنی بدون بچه

در اوایل بهار، قبل از اینکه نسل اول تخم گذاری شود، تمام قاب هایی که علائم بیماری لوک آمریکایی را داشتند از کندو برداشته شدند. این قاب ها می توانستند در کندو رها شوند. اما مشخص شد که سه نسل طول می کشد تا زنبورها این میزان را ایجاد کنند. بنابراین، این روش، یک راه حل مقرون به صرفه برای زنبورداران نیست.

هر قاب عسل یا گرده حاصل از این کندوی آلوده به بیماری AFB در جای خود باقی گذاشته شد. این قاب ها می توانند حاوی تخم لارو پنی باسیلوس باشند، اما اسپورها وقتی ضد عفونی و تمیز شوند در این کلنی درمان می شوند.
در این موقع از سال، نشانه غالب بیماری AFB ، مقیاس در سلول ها بود.
پس از برداشته شدن فریم ها، محلول کاسپین مخلوط با عسل، گرده، شربت و مقدار کمی آنتی بیوتیک به این کلنی ها خورانده شد.
این قاب ها می توانند حاوی تخم لارو Paenibacillus باشند، اما اسپورها وقتی جوانه بزنند در این کلنی درمان می شوند.
 

روش کلنی با بچه

در این روش کلنی ها با بچه را باید تقسیم کرد و بچه را از ملکه جدا کرد. در یک کندوی معمولی که دارای ۹ قاب زنبور و پنج قاب بچه بود، با چهار قاب زنبور عسل بدون بچه به یکی از دو روش برخورد شد. اگر این قاب ها شامل مقیاس بودند، آنها بر روی تجهیزات فاقد AFB (( بدون مقیاس در شانه یا شانه تابش) تابیده می شدند و ملکه تخمگذار به این کندو داده می شد.

اگر قاب های دارای جمعیت، اما بدون بچه، قاب های عسلی یا گرده ای باشند، هیچ تکانی برای جمعیت لازم نیست. این قاب های کامل شده با ملکه تخمگذار، می توانند به یک کندوی جدید منتقل شوند. این کندوی جدید با محلول کاسپین مخلوط شده با عسل، گرده، شربت و مقدار کمی آنتی بیوتیک تغذیه شد.

پنج قاب دیگر از بچه و لارو با محلول کاسپین مخلوط شده با عسل، گرده، شربت و آنتی بیوتیک تحت درمان قرار گرفتند و به مدت ۲۱ روز دست نخورده باقی ماندند.

نکته:

این کندوی دست نخورده یک ملکه جدید تولید کرد. قبل از اینکه ملکه جدید شروع به تخمگذاری کند، هر قاب با مقیاس AFB با قاب های تمیز (بدون مقیاس یا تابش) جایگزین شد. دلیل اینکه این کار در پایان دوره ۲۱ روزه انجام شد، این بود که اجازه بیرون آمدن و پدیدار شدن همه زنبورها را داد.

درمان دیگر با محلول کاسپین مخلوط با عسل، گرده، شربت و مقدار کمی آنتی بیوتیک بلافاصله وقتی ملکه جدید شروع به تخمگذاری در روزهای ۲۷ یا ۲۸ شروع میکند.

یک درمان نهایی با محلول کاسپین مخلوط با عسل، گرده ، شربت و مقدار کمی آنتی بیوتیک در روز ۴۲ انجام شد. درمان نهایی با هر بیماری که در نسل جدید ادامه داشت، انجام شد.

این روند که با کندوهای آلوده به بیماری لوک آمریکایی آغاز شد، برای هر کندوی آلوده دو کندوی عاری از بیماری ایجاد کرد. بیماری AFB از زنبورستان حذف شد.
 

نتایج آزمایش و بررسی

محلول کاسپین از سال ۱۹۸۶ در ایران برای درمان AFB استفاده می شود و در کانادا در سال ۲۰۰۰ معرفی شده است. مطالعات در هر دو کشور به طور مداوم با نتایج موفقیت آمیزی انجام شده است.
 

سال ۱۹۹۵

در سال ۱۹۹۵ در ایران، ۵۰ کندو به بیماری لوک آمریکایی آلوده شدند. ۲۰ مورد با محلول کاسپین و آنتی بیوتیک درمان شدند. ۲۰ مورد فقط با آنتی بیوتیک، ۵ مورد فقط با محلول کاسپین و ۵ کندو تحت درمان قرار نگرفتند تا به عنوان تست و آزمایش عمل کنند.

۱۰۰٪ بیماری AFB ، از کلنی هایی که محلول کاسپین و آنتی بیوتیک دریافت کرده بودند حذف شد.
۵٪ از بیماری AFB از کلنی هایی که به تنهایی آنتی بیوتیک دریافت می کردند، حذف شد.
۷۵٪ از بیماری AFB از کلنی هایی که محلول کاسپین را به تنهایی دریافت کرده بودند، حذف شد. اما کلنی های باقیمانده ضعیف و مستعد ابتلا به عفونت بودند.

بیماری لوک آمریکایی تمام کندوهای تست و آزمایش را از بین برد. از محلول کاسپین همراه با پنج خانواده مختلف آنتی بیوتیک استفاده شد. در همه موارد راه حل ۱۰۰٪ موثر بود. آنتی بیوتیک هایی که نتیجه مثبت دادند: اریترومایسین (erythromycin)، استرپتومایسین (streptomycin)، آمپی سیلین(ampicillin)، O.T.C  و آموکسی سیلین (amoxicillin) بودند.
 

سال ۲۰۰۰

در سال ۲۰۰۰ ، ۴۲ کلنی آلوده به AFB در یک زنبورستان در ریچموند، بریتیش کلمبیا، کانادا، با محلول کاسپین و آنتی بیوتیک تحت درمان قرار گرفتند. بیماری AFB پس از نسل اول از ۳۷ کلنی حذف شد و ۵ مورد دیگر پس از نسل دوم بیماری آزاد شدند. یک بازرس دولتی زنبور عسل نتایج را مشاهده کرد.
 

سال ۲۰۰۱

در سال ۲۰۰۱ چهار زنبورستان اضافی با کلنی های آلوده به AFB با محلول کاسپین تحت درمان قرار گرفتند. راه حل، تحت نظارت بازرس زنبور مرزی دولت بود. بیماری AFB از همه این زنبورستان ها حذف شد.
 

سال ۲۰۰۲

در سال ۲۰۰۲ ، دو زنبورستان تجاری در کانادا، هرکدام با ۵۰۰۰ کندو، با راه حل کاسپین تحت درمان قرار گرفتند. قبل از درمان، هر اپراتور تقریباً ۲۰٪ از زنبورهای خود را به دلیل بیماری AFB از دست داده بود. در هر دو مورد ۱۰۰٪ بیماری لوک آمریکایی از بین رفته و کلنی ها به سلامت و شادابی بازگشتند.
 

سال ۲۰۰۳

در زمان نگارش این مقاله، یک آزمایش کاملا مستند دیگر در برنابی، بریتیش کلمبیا، کانادا. در حال انجام بوده است. پاول ون وسندورپ، زنبوردار استان کلمبیا و بازرسان محلی زنبورداری، جکی بانز، شاهد ترکیب و کاربرد محلول بوده اند و مستندسازی کرده اند. همچنین نمونه هایی را برای تجزیه و تحلیل جمع آوری کرده و نتایج را تأیید  کردند. بیماری لوک آمریکایی از همه ۲۵ کندو موجود در آخرین تست و آزمایش میدانی حذف شد.

در اکتبر سال ۲۰۰۲ روی هنینگ و حسین یگانه راد ۳۲۰ کندو از Dawson Creek خریداری کردند. ۴۰٪ از کندوها به بیماری AFB  آلوده بودند. در زمان نگارش این گزارش، یک برنامه درمانی راه حل کاسپین که در مارس سال ۲۰۰۳ آغاز شده بود، این بیماری را از زنبورستان آزاد کرد.
 

بررسی های بیشتر

تیم های تحقیقاتی شامل زنبورداران، میکروب شناسان، داروسازان و متخصصان زنبورداری دولتی، به این نتیجه رسیدند که ترکیب محلول کاسپین با مقدار کمی آنتی بیوتیک ۱۰۰٪ بیماری لوک آمریکایی را از یک کلنی از بین می برد. کلنی های تحت درمان به سلامتی و نشاط بازگشتند. عسل موجود در این کلنی ها عاری از هرگونه پسماند و رسوب بود.

اثر ترکیبی محلول کاسپین و مقدار کمی آنتی بیوتیک پیش رونده و تجمعی هستند. این ماده مغذی و محلول غنی از فرمون، زنبورها را تحریک می کند تا بیماری AFB را ضدعفونی و تمیز کرده و مقادیر زیادی ژله کارگر تولید کنند. این رفتار باعث تسریع رویش تخم لارو Paenibacillus می شود که جمعیت زیادی از لارو پنی باسیلوس را تولید می کند. باکتری هایی که قبل از آلودگی به آنتی بیوتیک آسیب پذیر هستند.

تأثیر مقادیر بیشتری ژله کارگر بر روی ملکه به همان اندازه مهم است.
 

نتایج بدست آمده

افزایش پتانسیل پروتئینی زنبورهای عسل در کندو، ملکه را تحریک می کند تا تخم های بیشتری تخمگذاری کند. این امر لزوماً منجر به لارو زنبور عسل بیشتری می شود که باید به آن ژله کارگر داده شود. این اثرات هم افزایی و تجمعی، شرایط ایده آلی را ایجاد می کند برای: رویش مقدار زیادی از تخم های لارو Paenibacillus ، افزایش چشمگیر تعداد لاروهای Paenibacillus و باکتری ها، تخریب سریع و کامل لاروهای Paenibacillus و باکتری هایی با مقدار کمی آنتی بیوتیک.

در این روش درمانی، آنتی بیوتیک از نزدیک با محلول هایی که باعث ایجاد انفجار در جمعیت لارو Paenibacillus و باکتری ها شده اند، مخلوط می شود. بنابراین تخریب باکتری سریع و کارآمد است. سرعت و کارایی به معنای کاهش آنتی بیوتیک، عدم باقی ماندن آنتی بیوتیک و قرار گرفتن در معرض طولانی مدت آنتی بیوتیک است.

مزایای استفاده از محلول کاسپین

مزایا در کلنی ها با استفاده از محلول کاسپین اینست که رشد بچه ها بین ۸٫۵ تا ۱۰ در روز است. و رشد هر نسل بین ۱۸٫۵ تا ۲۰ روز محدود می شود. این تسریع در ظهور جنین به این معنی است که فقط یک یا دو کنه واروا می توانند در سلول های کارگر تخم گذاری کنند.

کلنی هایی که با محلول کاسپین تغذیه می شوند، بدون آنتی بیوتیک، آلودگی ها را ضدعفونی و تمیز می کنند. این روند رفتار بهداشتی تحریک شده توسط تغذیه، در شرایط طبیعی با منابع طبیعی مشاهده می شود. رفتار بهداشتی از فصلی به فصل دیگر متفاوت است و بیشترین میزان رفتار بهداشتی در دوره های تغذیه زیاد رخ می دهد. بر اساس این مشاهدات احتمالاً رفتار بهداشتی به تغذیه وابسته است.
 

سایر تکنیک های درمانی

دو روش درمانی جایگزین وجود دارد که به طور گسترده ای در زنبورداری استفاده می شود. این موارد عبارتند از: استفاده از پودرهای آنتی بیوتیک یا مایعات در پاییز و تکنیک های لرزش.
 

درمان با پودر و مایع آنتی بیوتیک

پودرها و مایعات آنتی بیوتیکی که به کندو اضافه می شوند، مشکلات زیادی دارند. استفاده از پودرها ناکارامد است. بخصوص پودرهایی که به صورت بلااستفاده در قسمت بالای قاب ها باقی می مانند. پودرهایی که در پاییز یا اوایل بهار استفاده می شوند، نمی توانند تخم های لارو Paenibacillus را از بین ببرند. و لاروهای Paenibacillus عمدتا به شکل تخم در کندو در این زمان از سال هستند.

این استفاده ناکارآمد از آنتی بیوتیک ها هزینه های کارگر و دارو را برای یک زنبوردار افزایش می دهد. آنتی بیوتیک های مایع در عسل یا گرده جایی که به طور فیزیکی از تخم لاروهای Paenibacillus جدا شده اند، ذخیره می شوند. برای بار دیگر شکل تخم باکتری ها در برابر حمله آنتی بیوتیکی آسیب پذیر نیست.

درمان های آنتی بیوتیکی مایع در پاییز ممکن است کنترل بیماری کمی داشته باشند. اما بیماری لوک آمریکایی دوباره باز می گردد. زیرا این یک برنامه درمانی نیست. به همین ترتیب، درمان های اولیه بهار با آنتی بیوتیک های مایع ممکن است بیماری AFB را برای مدت کوتاهی کنترل کنند. اما در بهار خطر آلودگی عسل بیشتر می شود.
 

تکان دادن به روش New Foundation

این تکنیک که تخم ها را از نظر فیزیکی جدا می کند، پرهزینه است و ۱۰۰٪ موثر نیست.  در بسیاری از عمل هایی که از این روش استفاده شده است، بیماری AFB بازگشته است. همچنین هزینه تجهیزات جدید و از دست دادن هزینه احیای تجهیزات مورد استفاده برای علاقه مندان و زنبورداران تجاری زیاد است.
 

جدول ۱- آزمایش راه حل شرکت کاسپین- ایران ۱۹۹۵
 

توجه:  * کلنی های باقیمانده ضعیف و مستعد ابتلا به عفونت مجدد بودند.*

مقاله ای از استاد حسین یگانه راد

تهیه شده و ترجمه توسط تیم شرکت کندوی چوبی کویر

هرگونه کپی برداری با ذکر منبع بلامانع است.